Detection of citrus psorosis-ringspot virus using RT-PCR and DAS-ELISA

Psorosis, sometimes also associated with ringspot symptoms, is a widespread and damaging disease of citrus in many parts of the world including South America and the Mediterranean basin. We describe the application of RT-PCR and DAS-ELISA diagnostics to an isolate of citrus ringspot virus (CtRSV-4) and other virus isolates associated with this disease. Fragments of cDNA from bottom-component RNA of CtRSV-4 were cloned and sequenced, and PCR primers were designed, 5'ACAATAAGCAAGACAAC upstream, and 5'CCATGTCACTTCTATTC downstream. RT-PCR experiments using these primers allowed detection of CtRSV-4 in infected citrus leaves down to a tissue dilution of 1/12 800 representing 2 μg of tissue, and less sensitive detection of the related citrus psorosis-associated virus (CPsAV90-1-1) and four other psorosis isolates from Argentina and the USA. In addition, CtRSV-4 particles were partially purified from local lesions in Chenopodium quinoa, and the preparations used to raise a rabbit antiserum. The antiserum was absorbed with extracts of healthy C. quinoa leaves, and a DAS-ELISA kit was prepared and tested for detection of CtRSV-4, CPsAV90–1-1, and other psorosis isolates from Argentina, the USA, Italy and Spain. The ELISA detected CtRSV-4 down to a tissue dilution of 1/1600, and most other psorosis isolates down to dilutions of 1/200–1/800. Three of a total of 20 heterologous isolates were consistently negative. Comparison of the PCR and ELISA results suggests that both methods can be used for detection of a range of psorosis isolates, but that variation of the viruses in the field might cause problems for any one diagnostic test.     

Utilisation de souches non pathogènes de Fusarium pour lutter contre les fusarioses: situation actuelle dans la pratique1

Des travaux antérieurs ayant permis de démontrer que des souches non pathogènes de Fusarium sont impliquèes dans les mécanismes de résistance des sols aux fusarioses, nous avons tenté d'utiliser des souches de Fusarium sélectionnées pour lutter contre ces maladies. Les bons résultats obtenus en conditions expérimentales nous ont conduits à mettre en place un réseau d'expérimentation en conditions normales de culture dans des serres de production de tomates et de melons. Le premier problème à résoudre est celui de la production massive d'inoculum, de sa conservation et de son introduction dans les sols et substrats de cultures. La production de l'inoculum est réalisée en fermenteur, les propagules produites soni récupérées par filtration et mélangées avec du talc, support inerte qui après avoir été séché assure la conservation et la distribution de cet inoculum dans des conditions satisfaisantes. Les quantités d'inoculum produites en 1985–86 ont permis de réaliser plusieurs essais de lutte dans des conditions normales de production. L'inoculum protecteur est apporté, soit dans les substrats de culture hors sol au moment de leur ensachage, soit dans les sols en place, immédiatement après leur désinfection au bromure de méthyle. L'installation de la souche protectrice est suivie régulièrement grace à des analyses microbiologiques et la gravité de la maladie est notée régulièrement en cours de culture. Les résultats enregistrés en 1986, variables d'une situation à l'autre, ne permettent pas de porter un jugement définif sur l'intéret de ce procédé de lutte. Ils sont cependant intéressants et permettent d'organiser sur des bases plus solides notre campagne d'expérimentation 1986–87.     

奶牛温氏支原体16SrRNA基因的PCR扩增、克隆及分析

目的对奶牛温氏支原体16SrRNA基因进行PCR扩增及克隆分析。方法从自然感染体的广西奶牛无菌采集血液,分离温氏支原体并提取病原基因组,用血营养菌的16SrRNA基因的通用引物进行PCR扩增,将扩增产物克隆到PGEM-Teasy载体后进行溺,I序和分析,并与Genebank上搜索的温氏支原体相应序列进行比较,建立系统发育树。结果PCR扩增得到长约1．5kb的扩增片段,测序结果显示该片段全长为1453bp,同源性分析表明该序列与Neimark公布的温氏支原体（前称温氏附红细胞体）（AF016546）的16SrRNA基因序列同源性达到97．4％,与系统发育进化树表明本株温氏支原体同本地株的关系较近,而与国外株的新缘关系较远。国内公布的广西株同源性为99．8％。结论结果表明证实该病原为温氏支原体,从分子生物学水平证实了温氏支原体在广西的存在。由于本试验分离得到的牛温氏支原体与国外发表的牛温氏支原体核苷酸序列相差2．6％,因此两者的基因型存在一定的差异,这对该病的分子流行病学分析具有一定的意义。     

High temperature effects on gas exchange for the invasive buffel grass (Pennisetum ciliare [L.] Link)

Buffel grass was introduced to the Sonoran Desert in the mid-twentieth century, where it has aggressively invaded new areas. Given its ecological success at a place where the air temperature can approach 50°C, the effects of high air temperatures on gas exchange were studied for this species. The carbon dioxide uptake and water use efficiency were maximal at day/night air temperatures of 30/20°C for potted plants, substantially decreasing at higher temperatures until the plants died at 45/35°C.     

BOOK REVIEW

The 5-MinuteVeterinary Consult: Canine and Feline . 2nd edn. Tilley LP, Smith FWK, Lippincott Williams & Wilkins     

Standing Laparoscopic Peritoneal Flap Hernioplasty of the Vaginal Rings does not Modify the Sperm Production and Motility Characteristics in Intact Male Horses

Laparoscopic hernioplasty techniques have been developed in the recent years to avoid the recurrence of inguinal hernias and to spare the testicles for breeding purposes in stallions. However, there have been no previous comprehensive and systematic studies of the reproductive outcomes and prognoses for stallions after inguinal hernioplasty. Therefore, the objective of this study was to assess the possible effects of one of these techniques (standing laparoscopic peritoneal flap hernioplasty) on the sperm production and motility characteristics of six healthy stallions that received this procedure based on 1‐year follow‐ups. There were no significant differences in the measured sperm variables (assessments based on the DSO, MOT, PMOT, VSL, VCL and VAP) during 1‐year follow‐ups.     

大通牦牛推广十年的回顾与展望

从2003年以来青海省大通种牛场开始了较大面积的推广工作,到今年己有10年的推广历史了。对一个新品种大面积推广10年是一个极为重要的时间节点。2005年农业部批准"大通牦牛"为新品种并决定颁发新品种证书。截止2013年前己向青海省6州1地1市39个县累计推广大通牦牛种公牛14 640余头,据2013年不完全统计,大通牦牛后裔在省内推广区达91万头以上。今后必需加快品系繁育提高大通牦牛整体水平;加强核心育种群管理确保种牛质量;加强种公牛的动态溯源管理;组识种牛场技术人员深入推广区,传授良种良养的配套技术和野外冷配技术。